性激素六項包括卵巢分泌的雌二醇、孕酮、雄激素睪酮及三個垂體分泌的激素，分別為FSH（卵泡刺激素）、LH（黃體生成素）、PRL（泌乳素）。當女性出現月經不調、月經稀發、停經或發現垂體瘤時，需要進行性激素六項檢查。男性出現性功能異常，如陽痿或發現垂體瘤時，需要進行性激素六項檢查。

女性一般可以選擇在月經來潮後3-4天空腹進行性激素六項測定，個別泌乳素異常的患者應遵醫囑，按照醫生規定的時間和飲食狀況進行專門的測定。